一种简易有效的提取真菌DNA化学改良方法

[目的]探索适合真菌基因组DNA提取的有效方法。[方法]以酵母茵（Hansenula sp.HS07A）和青霉菌（Penicillium sp.HS07）为供试菌株,分别采用煮沸裂解法、石英砂研磨法、研磨和反复研磨冻融法和化学改良法提取其基因组DNA,比较这4种方法的提取效果。[结果]化学改良法提取基因组DNA,除去了机械破壁过程,减少了机械力对DNA造成的破坏,运用阴离子去污剂SIB提取DNA安全、价廉,能有效、完整地提取高质量的基因组DNA,凝胶电泳条带清晰、无弥散,以此基因组DNA作为目的片段的PCR扩增模板,扩增效果优于改良前的方法,并且这种方法也适合多种真菌和细菌基因组DNA的提取。[结论]化学改良法是提取真菌基因组DNA的有效方法。     

不同砧木对藤稔葡萄光合特性的影响

以少毛变叶葡萄191(LDP-191)、LN33、巨峰为砧木,藤稔为接穗,利用CI-310便携式光合测定仪对在自然条件下藤稔葡萄3种嫁接苗和自根苗的净光合速率、蒸腾速率、气孔导度、光合有效辐射和胞间CO2浓度进行了测定。结果表明:3种嫁接苗与自根苗在晴天的净光合速率的日变化均呈双峰曲线,且3种嫁接组合的净光合速率明显比自根苗的净光合速率高;藤稔自根苗的日均气孔导度明显高于藤稔/LDP-191、藤稔/LN33;不同砧木嫁接的藤稔葡萄光合特性有明显差异,而LDP-191砧木与自根苗相比除净光合速率外其他光合指标均有显著性差异,说明LDP-191砧木对藤稔葡萄是较好的砧木。     

利用原子吸收光谱法测定怀牛膝中钾、钙、铁元素

采用原子吸收光谱法,检测了怀牛膝风筝棵和核桃纹2个品种中K、Ca、Fe元素的含量。结果表明,风筝棵和核桃纹中K、Ca、Fe元素的含量依次为K>Ca>Fe。此外,核桃纹中K、Ca的含量高于风筝棵中的,而风筝棵中的Fe含量明显高于核桃纹中的。进一步研究发现,怀牛膝根、茎、叶中K、Ca、Fe元素的含量不同,尤其在核桃纹品种的不同器官中含量差别较明显,而且2个品种风筝棵和核桃纹的同一部位中的K、Ca、Fe元素的含量也不同。以上结果表明,怀牛膝品种间或同一品种不同部位中K、Ca、Fe元素含量有明显差别。     

河南省驴寄生圆线虫的种类记述——盅口属Cyathostomum

2006-2007年,对河南省34头驴体内寄生圆线虫的感染情况进行调查,共发现22种圆线虫,隶属于2亚科7属。详细观察和描述了盅口属Cyathostomum的3种线虫:四刺盅口线虫Cya-thostomum tetracanthum、碗形盅口线虫Cyathostomum catinatum和蝶状盅口线虫Cyathostomum pateraturm。其中蝶状盅口线虫在河南省属首次报道,为河南省新记录种。     

杜仲叶生长发育过程中组织结构及指标成分含量的变化

[目的] 探讨杜仲叶结构发育与绿原酸积累的关系。[方法] 应用荧光显微技术和HPLC化学分析方法研究杜仲叶在生长发育过程中组织结构和指标成分的变化规律。[结果]叶片发育早期,随着栅栏薄壁组织、海绵薄壁组织等叶肉细胞的分化发育,杜仲叶片中绿原酸含量不断增加。6月叶片组织结构发育成熟时叶片中绿原酸的含量达到最高,为1.153%。随着叶片的衰老,叶片中绿原酸的含量不断降低,至落叶前叶片中绿原酸的含量最低,为0.483%。在紫外光下,绿原酸储备在叶表皮、叶柄表皮和果实表皮周围,呈现淡蓝色荧光现象。[结论] 综合分析叶片生物量和绿原酸的含量,7-8月份采集杜仲叶较合适。     

河南省驴寄生圆线虫的种类记述—三齿属Triodontophorus Looss，1902

[目的]调查河南省驴肠道寄生圆线虫的种类,为圆线虫的分类研究及其防治提供依据。[方法]对河南省地区的34头驴进行肠道检查、采集圆线虫,并在光学显微镜下进行形态学特征观察和种类鉴定。[结果]共鉴定出22种圆线虫,隶属于2亚科7属,其中三齿属Triodontophorus Looss,1902共检测到2种,即锯齿状三齿线虫Triodontophorus serratus（Looss,1900）Looss,1902和日本三齿线虫Triodontophorus nipponicus Yamaguti,1943。[结论]河南省地区驴存在锯齿状三齿线虫和日本三齿线虫感染,其感染率和平均感染强度都比较低。     

几种氨基酸前体物对红豆杉愈伤组织的生长和紫杉醇含量的影响

通过在培养基中加入紫杉醇合成的前体物质,提高愈伤组织紫杉醇含量和细胞生物量.在培养基中添加甘氨酸、L-丝氨酸、L-苯丙氨酸和D-苯丙氨酸,培养40 d后,测定愈伤组织紫杉醇含量和细胞生物量.分析得到甘氨酸、丝氨酸、L-苯丙氨酸能提高细胞紫杉醇的合成能力,但对愈伤组织的生长有抑制作用.D-苯丙氨酸对愈伤组织的生长有显著的促进作用,也显著提高紫杉醇合成能力,愈伤组织中紫杉醇含量高达0.224%.     

基于matK序列的木犀属植物系统发育初步研究

以流苏树属的流苏树,女贞属的女贞和木犀榄属的木犀榄作为外类群,利用叶绿体matK基因序列,对木犀属19个种进行种间亲缘关系及系统分类学研究。结果表明:①木犀属植物叶绿体matK基因序列较为保守,特别表现在3′端;②木犀属植物是一单系类群;③19种木犀属植物可以分为3个分支:香花木犀和华东木犀各单独聚为一个分支;其余聚为一个分支;其中美洲木犀、牛矢果和厚边木犀聚为一个亚分支,都属于圆锥花序组;木犀组的红柄木犀、毛木犀、石山桂、狭叶木犀和管花木犀组的山桂花5种植物聚为一个亚分支;其余的9种木犀组植物聚为一个亚分支;④经典的基于形态学的P.S.Green分类系统没有得到分子数据的支持,圆锥花序组聚在一起,而木犀组和管花木犀组之间的亲缘关系是交叉的。因此作者认为matK序列需要结合其他分子序列以及形态学指标进行综合分析,才能获得科学合理的木犀属分类系统。      

淇河鲫生长激素基因cDNA的克隆和原核高效表达

从脑垂体中提取总RNA,用RT-PCR方法扩增并克隆到淇河鲫(Carassius auratus gibelio var)的生长激素(GH)基因cDNA,其GenBank注册号为DQ350437.分析其核苷酸序列和推测的氨基酸序列,结果显示:克隆到的淇河鲫生长激素基因的开放阅读框(ORF)包括633个核苷酸,编码210个氨基酸,其中,包括22个氨基酸的信号肽和188个氨基酸的成熟肽.把GH成熟肽的cDNA克隆入表达载体pET-28a,在大肠杆菌BL21(DE3)表达N端含6个组氨酸的融合多肽.SDS-PAGE结果表明,0.1 mmol/LIPTG诱导表达的蛋白约为23.5 kD,其表达量超过蛋白总量的50%,主要为不溶性的包涵体.细菌裂解液沉淀溶于8mol/L尿素后,用固定化金属配体亲和层析纯化,获得了分子量约为23.5kD的单一蛋白带.     

外源菌剂处理秸秆还田对小麦形态及生理特性的影响

通过小麦盆栽和原位处理秸秆还田试验,研究了外源菌剂H-1、R-1和T-1处理秸秆后对小麦形态、生理及产量的影响.施菌剂处理的小麦苗期各形态指标均高于对照,但差异不显著;施菌剂处理的小麦叶绿素含量和小麦根系活力均显著高于不施菌剂的处理.施菌剂处理的小麦分蘖数、千粒重显著高于其他处理,其中用H-1还田处理的千粒重最高;叶绿素在小麦各生育期变化明显;各处理小麦整个生育期内根系活力总变化趋势相同,幅度大小有所差异.